خالص سازی وتعیین خصوصیات کینتیکی آنزیم آسپاراژیناز در باکتری serratia marcescens

Authors

لیلا آب خویی

داریوش مینایی تهرانی

مینا کلاهدوز محمدی

فرشته افتخار

نیلوفر کرجی

abstract

آسپاراژیناز یک آنزیم هیدرولاز می باشد که آسپاراژین را به آمونیوم و آسپارتیت تبدیل می کند. این آنزیم کاربرد مؤثری در درمان لوسمی لنفوبلاستیک دارد. marcescens serratia یک باکتری گرم منفی است که کلنیهای آن دارای رنگیزه قرمز می باشند که می تواند در صورت حضور آسپاراژین در محیط کشت خود، تولید آنزیم آسپاراژیناز نماید. در این تحقیق آنزیم آسپاراژیناز از محیط کشت serratia خالص سازی و همچنین فاکتور های کینتیکی آن تعیین شد. باکتری serratia در محیط مایع حاوی پپتون، عصاره مالت و آسپاراژین کشت شد و محیط بعد از 44 ساعت سانتریفیوژ شد و محلول رویی که دارای آنزیم آسپاراژیناز بود برای مطالعات کینتیکی و خالص سازی مورد استفاده قرار گرفت. مراحل تخلیص آنزیم با استفاده از رسوب دهی با آمونیوم سولفات و به دنبال آن دیالیز و ستون کروماتوگرافی deae سلولز انجام شد. انجام الکتروفورز به روش sds-page باندی با وزن مولکولی تقریبی حدودkda 54 را بر روی ژل نشان داد که نشان دهنده خلوص آنزیم بود. مقایسه تأثیر تغییرات ph (10-4) بر فعالیت آنزیم نشان داد که بیشترین فعالیت آنزیم در 7 ph است، و بررسی تغییرات دما بر فعالیت آنزیم نشان داد که بیشترین فعالیت در دمای 40 درجه سانتی گراد می باشد. همچنین مقدار فاکتور های کینتیکی vmax و km در این آنزیم مشخص گردید.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

خالص سازی وتعیین خصوصیات کینتیکی آنزیم آسپاراژیناز در باکتری Serratia marcescens

آسپاراژیناز یک آنزیم هیدرولاز می باشد که آسپاراژین را به آمونیوم و آسپارتیت تبدیل می کند. این آنزیم کاربرد مؤثری در درمان لوسمی لنفوبلاستیک دارد. marcescens Serratia یک باکتری گرم منفی است که کلنیهای آن دارای رنگیزه قرمز می باشند که می تواند در صورت حضور آسپاراژین در محیط کشت خود، تولید آنزیم آسپاراژیناز نماید. در این تحقیق آنزیم آسپاراژیناز از محیط کشت Serratia خالص سازی و همچنین فاکتور های ک...

full text

بررسی نقش آمینواسیدهای اطراف توالی جایگاه فعال در فعالیت آنزیم کیتیناز باکتری Serratia Marcescens B4A

کیتینازها یکی از آنزیم‌های صنعتی مهم محسوب می‌شوند که از اهمیت بسزایی در خصوص تجزیه مواد کیتینی، پاکسازی محیط زیست و کنترل قارچ‌های پاتوژن گیاهی و آفات دارند که با شکستن اتصالات گلیکوزیدی -1,4 سبب تجزیه کیتین می‌شوند. این آنزیم‌ها در ساختار خود دارای دمین کاتالیتیکی 8 (β/α) حاوی توالی‌های حفاظت شده‌ای به نام موتیف DXDXE روی رشته 4β هستند که آسپارتات و گلوتامات موجود در این توالی و همچنین آمینو...

full text

Serratia marcescens.

Over the last 30 years, Serratia marcescens has become an important cause of nosocomial infection. There have been many reports concerning the identification, antibiotic susceptibility, pathogenicity, epidemiological investigations and typing of this organism. Accurate identification is important in defining outbreaks. The API 20E system has been used widely, but is not individually satisfactor...

full text

Serratia marcescens

The nucleotide sequence of the proBA operon from a proline-hyperproducing mutant of Serratia marcescens was determined. Two base substitutions were found: one in theproBstructura1 gene, coding for y-glutamyl kinase (GK), and a second one in the promoter region of the operon. The former base substitution led to a change of the predicted amino acid at position 117 from an alanine to a valine in G...

full text

بررسی نقش آمینواسیدهای اطراف توالی جایگاه فعال در فعالیت آنزیم کیتیناز باکتری serratia marcescens b۴a

کیتینازها یکی از آنزیم های صنعتی مهم محسوب می شوند که از اهمیت بسزایی در خصوص تجزیه مواد کیتینی، پاکسازی محیط زیست و کنترل قارچ های پاتوژن گیاهی و آفات دارند که با شکستن اتصالات گلیکوزیدی -1,4 سبب تجزیه کیتین می شوند. این آنزیم ها در ساختار خود دارای دمین کاتالیتیکی 8 (β/α) حاوی توالی های حفاظت شده ای به نام موتیف dxdxe روی رشته 4β هستند که آسپارتات و گلوتامات موجود در این توالی و همچنین آمینو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله پژوهش های سلولی و مولکولی

Publisher: انجمن زیست شناسی ایران

ISSN 2383-2738

volume 28

issue 2 2015

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023